Minute™ Total Lipid Raft Isolation Kit for Mammalian Cells/Tissues, nr kat. LR-039

Tratwy lipidowe to małe domeny błonowe zawierające wysoki poziom cholesterolu i sfingolipidów. Tratwy lipidowe znajdują się w błonie komórkowej (PM) i wewnętrznych błonach organellarnych, takich jak błona związana z mitochondriami (MAM) i siateczka śródplazmatyczna. Są one zaangażowane w liczne procesy komórkowe, w tym między innymi w przekazywanie sygnału, transport błonowy i sortowanie białek. Białka modyfikowane lipidami i niektóre białka transbłonowe są skoncentrowane w tratwach, podczas gdy inne białka są wykluczone. Stwierdzono również, że tratwy lipidowe są powiązane z ATPazą Na+/K+ na błonie komórkowej. Tratwy lipidowe izoluje się za pomocą gradientu sacharozy lub gradientu OptiPrep, tradycyjnie stosując ultrawirowanie, które wymaga dużej ilości materiału wyjściowego. Protokół jest żmudny i czasochłonny. Zestaw ten został opracowany przy użyciu naszych opatentowanych technologii opartych na kolumnach spinowych, oferując szybki i łatwy sposób izolowania tratw lipidowych. Całkowitą frakcję błonową (w tym błony PM i organelli) najpierw izoluje się i traktuje niejonowym detergentem zawierającym bufor, a następnie izoluje frakcję oporną na detergenty poprzez wirowanie flotacyjne przy użyciu jedynie mikrowirówki stołowej. Wysoce wzbogacone całkowite tratwy lipidowe można uzyskać z hodowanych komórek/tkanek w czasie krótszym niż 90 minut bez stosowania gradientu gęstości i ultrawirowania.